инженер-химик.рф

Информационный портал для химиков


Архив для Метки: Белки

Гидрофобная хроматография белков

Hydrophobic Interaction Chromatography (HIC) Принцип использования гидрофобной хроматографии HIC Белки в водном растворе имеют различные поверхностные группы и подвергаются воздействию растворителей в различной степени, в зависимости от структуры белка. Эти группы могут быть гидрофильными, содержащие полярные группы(Asp, Gly, Lis, His, Arg, Gly, Ser, Thr),  или они могут быть гидрофобными, такие как в аминокислотах фенилаланин, тирозин и триптофан. Гидрофобные группы […]

Разделение белков по коэффициенту седиментации

Мы уже видели, что центрифугирование является мощным и, как правило легко применимым способом отделения смеси компонентов клеток, но также полезны для разделения и анализа биомолекул. С помощью этой техники, мы можем определить такие параметры, как масса и плотность, узнать что-то о форме молекулы, и исследовать взаимодействие между молекулами. Для того, чтобы вывести эти свойства из […]

Осаждение белков

Реакции осаждения белков. Белки в р-ре и соответственно в организме сохраняются в нативном состоянии за счет факторов устойчивости, к которым относятся заряд белковой молекулы и гидратная оболочка вокруг нее. Удаление этих факторов приводит к склеиванию молекул белков и выпадению их в осадок. Осаждение белков может быть обратимым и необратимым в зависимости от реактивов и условий […]

Тепловая денатурация белков

На начальном этапе очистки для разделения белков иногда используют тепловую обработку. Она эффективна, если белок относительно устойчив в условиях нагревания, в то время как сопутствующие белки денатурируют. При этом варьируют рН раствора, продолжительность обработки и температуру. Для выбора оптимальных условий предварительно проводят серию небольших опытов. В молекулярной перестройке белков при денатурации активная роль принадлежит воде, […]

Диализ белков

Концентрирование и диализ тесно связаны между собой. При диализе низкомолекулярные вещества удаляются из образца и замещаются буфером. Традиционным является способ диализа через целлофановую пленку. В продаже имеются диализные трубки различного диаметра, обычно они не пропускают молекулы крупнее 15 000-20 000 Да. Для более полного удаления низкомолекулярных веществ в процессе диализа необходима смена буферного раствора в […]

Разрушение клеток и экстракция белка

Большая часть белков и ферментов, изученных в ранний период развития белковой химии, были внеклеточными. Причина этого в том, что такие белки сравнительно легко выделялись, внеклеточные белки более стабильны (часто имеют в своей структуре дисульфидные мостики), обладают небольшой молекулярной массой. Именно для этих белков первыми были установлены структуры: для лизоцима, рибонуклеазы, химотрипсина. Однако большинство белков локализовано внутри […]

Хранение белков

Как полученный материал, так и экстракт из него, следует хранить замороженными. При низких температурах, прежде всего, замерзает свободная вода, и кристаллы льда разрушают мембраны и органеллы, но не повреждают белки. Интересно, что при -15° (в бытовых холодильниках) некоторые соли буфера выпадают в осадок, изменяется рН раствора, а в оставшемся незамерзшем концентрированном растворе могут, хотя и […]

Материал для получения белков

Выбор исходного материала зависит от того, какая ставится цель. Если необходимо, например, изучить фермент определенного типа, безотносительно источника, выбирают тот, который содержит большие количества фермента, а сам источник доступен. При выборе организмов того или иного вида обращают внимание на легкость его выращивания. Из животных часто используют крыс, кроликов. Если источником является определенный орган, то берут […]